UPLC超高壓裝柱機(jī)的核心在于其采用高性能雙泵頭組成的超高壓泵系統(tǒng),能夠達(dá)到18000psi。通過雙活塞調(diào)節(jié)排量并結(jié)合恒壓控制技術(shù),實(shí)現(xiàn)梯度壓力調(diào)整和流量范圍廣(0-12ml/min)的穩(wěn)定輸出。該系統(tǒng)集成了電腦軟件反控功能,可多節(jié)點(diǎn)設(shè)置壓力參數(shù),實(shí)時(shí)反饋至控制系統(tǒng)自動(dòng)調(diào)節(jié)溶劑流量,確保填充過程中系統(tǒng)壓力恒定。這種精密的壓力動(dòng)態(tài)平衡機(jī)制為均勻裝填提供了基礎(chǔ)保障。
區(qū)別于傳統(tǒng)色譜柱需要復(fù)雜的連接管路與接頭,現(xiàn)代UPLC超高壓裝柱機(jī)采用無管路接頭方案。例如,通過直連結(jié)構(gòu)直接對(duì)接色譜柱及相關(guān)設(shè)備,消除了中間連接部件導(dǎo)致的死體積和泄漏風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)簡化了安裝流程。配合手緊式機(jī)械密封裝置,操作人員手動(dòng)旋轉(zhuǎn)即可完成緊密固定,既避免了工具誤操作帶來的密封不良問題,又提升了系統(tǒng)的可靠性。
在高壓作用下,帶有微粒填料的勻漿液被高效注入色譜柱內(nèi)腔。通過準(zhǔn)確控制的線性流速和持續(xù)的壓力波動(dòng)補(bǔ)償技術(shù),確保微小顆粒在整個(gè)柱床內(nèi)實(shí)現(xiàn)高度均勻的堆積密度。這一過程有效減少了傳統(tǒng)裝填方法可能產(chǎn)生的溝流或空隙率差異,從而優(yōu)化分離效果。
UPLC超高壓裝柱機(jī)的測定步驟:
1.準(zhǔn)備工作
-流動(dòng)相處理:確保所使用的流動(dòng)相經(jīng)過過濾和脫氣處理,以去除其中的顆粒雜質(zhì)和溶解氣體。這一步非常重要,因?yàn)槿魏挝⑿〉念w?;驓馀荻伎赡苡绊懼Ш秃罄m(xù)的檢測結(jié)果。
-樣品預(yù)處理:對(duì)需要分析的樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理,如過濾、離心等操作,以去除大分子雜質(zhì)、顆粒物和不溶性物質(zhì)。對(duì)于復(fù)雜樣品,還可以采用固相萃取等方法進(jìn)一步凈化,以防止這些雜質(zhì)進(jìn)入保護(hù)柱造成堵塞或污染。
2.安裝與連接
-保護(hù)柱與色譜柱連接:在擰緊過程中,要控制好力度,避免過度用力導(dǎo)致柱芯或卡套損壞,從而影響保護(hù)柱的性能。
-系統(tǒng)檢查:在開始之前,仔細(xì)檢查整個(gè)系統(tǒng)的密封性和連接是否牢固,特別是高壓環(huán)境下的各個(gè)接口處,確保無泄漏現(xiàn)象。
3.參數(shù)設(shè)置與啟動(dòng)
-壓力調(diào)節(jié):根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求設(shè)定合適的壓力范圍。UPLC系統(tǒng)的工作壓力通常超過15,000 psi,可達(dá)18000psi,通過雙活塞調(diào)節(jié)排量并實(shí)現(xiàn)恒壓控制梯度壓力。
-流量調(diào)整:設(shè)置所需的流量范圍(一般為0-12ml/min),以保證均勻且穩(wěn)定的填料填充過程。
4.裝柱過程監(jiān)控
-實(shí)時(shí)監(jiān)測:在整個(gè)裝柱過程中,密切監(jiān)控系統(tǒng)的壓力變化。如果發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)壓力異常升高,可能是由于保護(hù)柱或色譜柱存在堵塞問題,應(yīng)立即停止分析并排查原因,避免過高的壓力對(duì)設(shè)備造成損壞。